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          滅菌后小導(dǎo)管內(nèi)留有氣泡的原因分析及其解決辦法

          時(shí)間:2024-11-01      來(lái)源:admin      點(diǎn)擊:209次

          大腸菌群(大腸桿菌)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基(LST)滅菌時(shí),偶爾會(huì)有小氣泡留在小導(dǎo)管內(nèi),導(dǎo)致培養(yǎng)基不能使用。重復(fù)滅菌不僅費(fèi)時(shí)費(fèi)電,還會(huì)破壞培養(yǎng)基的成分。 

          原因一:過(guò)早打開(kāi)滅菌鍋

          當(dāng)滅菌鍋壓力表示數(shù)為0而溫度表示數(shù)還高于室溫時(shí),不要打開(kāi)滅菌鍋。因?yàn)榇蜷_(kāi)鍋蓋瞬間,鍋內(nèi)大量熱量散出,溫度突然降低,試管內(nèi)溫度也隨著降低,導(dǎo)致管內(nèi)氣壓減小,沸點(diǎn)降低,部分水會(huì)汽化留在小導(dǎo)管內(nèi)。

          原因二:試管塞塞得太緊(使用硅膠塞的時(shí)候)

          試管塞塞得太緊在滅菌時(shí)會(huì)導(dǎo)致試管內(nèi)與滅菌鍋內(nèi)壓力不一致。在滅菌鍋升溫升壓時(shí),鍋內(nèi)壓力會(huì)大于管內(nèi)壓力;滅菌鍋降溫降壓時(shí),鍋內(nèi)壓力小于管內(nèi)壓力。鍋內(nèi)壓力會(huì)大于管內(nèi)壓力時(shí),試管內(nèi)壓力不夠,不能將小導(dǎo)管內(nèi)氣體排盡,就留有氣泡;鍋內(nèi)壓力小于管內(nèi)壓力時(shí),可能會(huì)使試管塞和培養(yǎng)基崩出,培養(yǎng)基報(bào)廢。

          原因三:小導(dǎo)管口太小或者太長(zhǎng)

          我們可以把一根毛細(xì)管一端封口,另一端插進(jìn)水里,毛細(xì)管里怎么都不會(huì)進(jìn)水。同樣把一個(gè)燒杯倒扣進(jìn)水里就很容易進(jìn)水了。小導(dǎo)管在加壓后一方面水要進(jìn)去,另外里面的空氣要出來(lái),如果口太小的話,空氣不容易出去,水也不容易進(jìn)來(lái),就會(huì)導(dǎo)致氣泡留在里面了。

          原因四:培養(yǎng)基質(zhì)量引起

          由培養(yǎng)基質(zhì)量引起的氣體不能排盡或培養(yǎng)基含有高溫高壓分解產(chǎn)氣的成分。滅菌時(shí)用水做培養(yǎng)基組的對(duì)照試驗(yàn),若培養(yǎng)基組有氣泡,而對(duì)照組沒(méi)有氣泡,可確定是有此原因引起。

          原因五:滅菌鍋工作壓力不夠,使氣體不能排盡

          滅菌鍋?zhàn)畲髩毫Σ粔虿荒苁构軆?nèi)液體強(qiáng)行把氣體擠出,最后還留有小氣泡,還會(huì)使溫度上升緩慢,或達(dá)不到滅菌溫度。此原因的可能性較小,我們可以在排除原因一、二、三、四的情況下,用不加試管塞、大口導(dǎo)管做試驗(yàn),若還仍不能達(dá)到效果,就要檢查滅菌鍋了。

          一種高效的替代方法就是使用君立康即用型管裝培養(yǎng)基。

          一、在實(shí)驗(yàn)中液體渾濁的時(shí)候,傳統(tǒng)方法看不到產(chǎn)氣,君立康即用型管裝培養(yǎng)基自帶透視窗,可以直接查看到實(shí)驗(yàn)中是否產(chǎn)生氣泡。

          上圖中試管最左側(cè)是傳統(tǒng)方法陰性對(duì)照,最右側(cè)是君立康的試管的陰性對(duì)照,中間的前三根試管是加了樣品后傳統(tǒng)方法看不到產(chǎn)氣現(xiàn)象,后三根試管是加了樣品后君立康的試管可以清晰的看到產(chǎn)氣現(xiàn)象


          二、試管中含有產(chǎn)氣收集裝置,即使在實(shí)驗(yàn)前培養(yǎng)基中產(chǎn)生了氣泡,也可以將試管傾斜將氣泡導(dǎo)出。不會(huì)浪費(fèi)培養(yǎng)基。

          產(chǎn)氣收集裝置

          傾斜排氣

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