第一法大腸菌群檢驗MPN法
新老標(biāo)準(zhǔn)異同
原方法：MPN/ 100g(mL)
現(xiàn)方法：MPN/ g(mL)
操作過程請大家仔細閱讀 GB4789.3-2010
1.MPN法注意事項：
?全過程不得超過15min。
?樣品勻液的pH值應(yīng)在6.5～7.5之間，
?（如接種量需要超過1mL，則用雙料LST肉湯）
?以48h±2h為最終觀察結(jié)果時限。結(jié)果也以此時為最終結(jié)果
2.MPN法培養(yǎng)基：LST、BGLB
（1）月桂基磺酸鹽胰蛋白胨（LST）
月桂基磺酸鈉能抑制革蘭氏陽性菌的生長，同時比膽鹽的選擇性和穩(wěn)定性好。由于膽鹽與酸產(chǎn)生沉淀，沉淀有時候會使對產(chǎn)氣情況的觀察變得有些困難；
?乳糖是大腸菌群可利用發(fā)酵的糖類。有利于大腸菌群的生長繁殖并有助于鑒別大腸菌群和腸道致病菌；
?胰蛋白胨提供基本的營養(yǎng)成分；
?LST肉湯是國際上通用的培養(yǎng)基，與乳糖膽鹽肉湯的作用和意義相同，但具有更多的優(yōu)越性。
?發(fā)酵試驗判定原則：產(chǎn)氣為陽性。
?檢測步驟減少（不必分離培養(yǎng)），檢測時間縮短24h。
?注：如接種量超過1mL，則應(yīng)用雙料LST肉湯
（2）煌綠乳糖膽鹽肉湯（BGLB）
膽鹽可抑制革蘭氏陽性菌。
?煌綠是抑菌抗腐劑，可增強對革蘭氏陽性菌的抑制作用。
?乳糖是大腸菌群可利用發(fā)酵的糖類。有利于大腸菌群的生長繁殖并有助于鑒別大腸菌群和腸道致病菌。
?發(fā)酵試驗判定原則：產(chǎn)氣為陽性。由于配方里有膽鹽，膽鹽遇到大腸菌群分解
?乳糖所產(chǎn)生的酸形成膽酸沉淀，培養(yǎng)基可由原來的綠色變?yōu)辄S色，同時可看到管底通常有沉淀。
3.MPN檢索表的應(yīng)用
?MPN（最可能數(shù)most probable number）是表示樣品中活菌密度的估測。因此MPN值只是活菌密度的估算值，并不是樣品中活菌數(shù)的真值。
4.使用MPN檢索表的注意點
?這個MPN檢索表是ISO、FDA、AOAC、USDA/FSIS、北歐等標(biāo)準(zhǔn)通用的。
?表里的數(shù)字是有小數(shù)點的。
?報告單位不同。現(xiàn)報告單位為g/ml，而原報告單位是100g/ml。
?原標(biāo)準(zhǔn)MPN表有64個組合，而現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)MPN表只有40個組合。
當(dāng)實驗結(jié)果在MPN表中無法查找到MPN值時，如：陽性管數(shù)為122，123，232，233等時，建議增加稀釋度(可做4~5個稀釋度)，使樣品的最高稀釋度能達到獲得陰性終點(如果污染程度不能判定，則多加一稀釋度)，然后再遵循相關(guān)的規(guī)則進行查找，最終確定MPN值。
文章摘自《食品論壇》
400-081-4789
